HPAA

CAS No.: 23783-26-8
EC No.: 405-710-8

Synonyms:
HPAA; hpaa; Acetic acid, 2-hydroxy-2-phosphono- [ACD/Index Name]; Acetic acid, hydroxyphosphono-; Acide hydroxy(phosphono)acétique [French] [ACD/IUPAC Name]; Hydroxy(phosphono)acetic acid [ACD/IUPAC Name]; Hydroxy(phosphono)essigsäure [German] [ACD/IUPAC Name]; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; 115469-15-3 [RN]; 153733-51-8 [RN]; 23783-26-8 [RN]; 2-Hydroxy phosphono acetic acid; 2-Hydroxy-2-phosphonoacetic acid; 2-hydroxyphosphonoacetic acid; 2-Hydroxyphosphonocarboxylic Acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; 2-phosphoglycolic acid; ACETIC ACID 2-HYDROXY-2-PHOSPHONO-; HPAA; Hydroxyphosphono-acetic acid; Hydroxyphosphono-acetic acid|2-Hydroxy phosphono acetic acid|HPAA; MFCD01940970; MFCD20638215; Phosphoglycolic acid; PHOSPHONOGLYCOLIC ACID; α-Hydroxyl phosphonoacetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; α-Hydroxyphosphonoacetic acid; 2-Hydroxy-2-phosphono-acetic acid; 2-hydroxy-2-phosphonoacetic acid; 2-hydroxy-2-phosphono-ethanoic acid; Acetic acid, hydroxyphosphono-; alpha.-Hydroxyl phosphonoacetic acid; alpha.-Hydroxyphosphonoacetic acid; HPA; HPAA; HPSE; HPSE1; Belcor 575; Heparanase-1; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; Snailagglutinin; Endo-glucoronidase; Phosphonoglycolic acid; Heparanase [Precursor]; Hydroxyphosphonoacetic acid; Acetic acid, hydroxyphosphono-; 2-[hydroperoxy(hydroxy)phosphoryl]acetic acid; 2-(Hydroperoxy(hydroxy)phosphoryl)acetic acid; hydroxyphosphono acetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; SCHEMBL560738; ZINC100443591; DB-029902; Hydroxyphosphono-acetic acid; 2-Hydroxy phosphono acetic acid; HPA; HPAA; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; Hydroxyphosphono-acetic acid; N-HEXYLPHOSPHONIC ACID; LABOTEST-BB LT00408920; hpaa; n-Hexylphosphonicacid,min.97%; 2-Hydroxyphosphonocarboxylic Acid; 2-Hydroxy Phosphonoacetic Acid; 2-Hydroxy Phosphonic Acetic AcidStructure; hexylphosphonic acid; hexylphosphonate; Acetic acid, 2-hydroxy-2-phosphono-; 2-hydroxy-2-phosphonoacetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; 2-Hydroxyphosphonoacetic Acid; 2-hydroxy-2-phosphono-acetic acid; Phosphono-hydroxy-acetic acid; SCHEMBL254667; 2-Hydroxyphosphonocarboxylic Acid; CTK1A2951; DTXSID40865115; .alpha.-Hydroxyphosphonoacetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; .alpha.-Hydroxyl phosphonoacetic acid; AKOS015892863; VZ34695; FT-0694552; EC 405-710-8; 2-Hydroxy-2-phosphonoacetic acid 23783-26-8; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; Acetic acid, 2-hydroxy-2-phosphono- [ACD/Index Name]; Acetic acid, hydroxyphosphono-; Acide hydroxy(phosphono)acétique [French] [ACD/IUPAC Name]; Hydroxy(phosphono)acetic acid [ACD/IUPAC Name]; Hydroxy(phosphono)essigsäure [German] [ACD/IUPAC Name]; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; 115469-15-3 [RN]; 153733-51-8 [RN]; 23783-26-8 [RN]; 2-Hydroxy phosphono acetic acid; 2-Hydroxy-2-phosphonoacetic acid; 2-hydroxyphosphonoacetic acid; 2-Hydroxyphosphonocarboxylic Acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; 2-phosphoglycolic acid; ACETIC ACID 2-HYDROXY-2-PHOSPHONO-; HPAA; Hydroxyphosphono-acetic acid; Hydroxyphosphono-acetic acid|2-Hydroxy phosphono acetic acid|HPAA; MFCD01940970; MFCD20638215; Phosphoglycolic acid; PHOSPHONOGLYCOLIC ACID; α-Hydroxyl phosphonoacetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; α-Hydroxyphosphonoacetic acid; 2-Hydroxy-2-phosphono-acetic acid; 2-hydroxy-2-phosphonoacetic acid; 2-hydroxy-2-phosphono-ethanoic acid; Acetic acid, hydroxyphosphono-; alpha.-Hydroxyl phosphonoacetic acid; alpha.-Hydroxyphosphonoacetic acid; HPA; HPAA; HPSE; HPSE1; Belcor 575; Heparanase-1; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; Snailagglutinin; Endo-glucoronidase; Phosphonoglycolic acid; Heparanase [Precursor]; Hydroxyphosphonoacetic acid; Acetic acid, hydroxyphosphono-; 2-[hydroperoxy(hydroxy)phosphoryl]acetic acid; 2-(Hydroperoxy(hydroxy)phosphoryl)acetic acid; hydroxyphosphono acetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; SCHEMBL560738; ZINC100443591; DB-029902; Hydroxyphosphono-acetic acid; 2-Hydroxy phosphono acetic acid; HPA; HPAA; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; Hydroxyphosphono-acetic acid; N-HEXYLPHOSPHONIC ACID; LABOTEST-BB LT00408920; hpaa; n-Hexylphosphonicacid,min.97%; 2-Hydroxyphosphonocarboxylic Acid; 2-Hydroxy Phosphonoacetic Acid; 2-Hydroxy Phosphonic Acetic AcidStructure; hexylphosphonic acid; hexylphosphonate; Acetic acid, 2-hydroxy-2-phosphono-; 2-hydroxy-2-phosphonoacetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; 2-Hydroxyphosphonoacetic Acid; 2-hydroxy-2-phosphono-acetic acid; Phosphono-hydroxy-acetic acid; SCHEMBL254667; 2-Hydroxyphosphonocarboxylic Acid; CTK1A2951; DTXSID40865115; .alpha.-Hydroxyphosphonoacetic acid; HPAA; hpaa; HPAA; hpaa; .alpha.-Hydroxyl phosphonoacetic acid; AKOS015892863; VZ34695; FT-0694552; EC 405-710-8; 2-Hydroxy-2-phosphonoacetic acid 23783-26-8; HPAA; hpaa

HPAA

ABSTRAIT
L'infection par le pathogène gastrique humain Helicobacter pylori peut entraîner une gastrite chronique, un ulcère peptique et un cancer gastrique. Toutes les souches de H. pylori expriment la protéine HpaA localisée en surface, un candidat prometteur pour un vaccin contre l'infection à H. pylori. Pour étudier l'importance physiologique de HpaA, une mutation du gène hpaA a été introduite dans une souche de H. pylori adaptée à la souris. Pour justifier que l'interruption du gène hpaA n'a provoqué aucun effet polaire des gènes en aval ou était associée à une seconde mutation de site, les profils d'expression protéique des souches mutantes et de type sauvage ont été caractérisés par deux approches protéomiques différentes. L'analyse par électrophorèse bidimensionnelle différentielle en gel d'extraits de cellules entières et le fractionnement sous-cellulaire combiné à la chromatographie nano-liquide - La spectrométrie de masse par résonance cyclotronique ionique à transformée de Fourier pour le profilage des protéines de la membrane externe n'a révélé que des différences mineures dans le profil protéique entre le mutant et la nature -types souches. Par conséquent, la souche mutante a été testée pour sa capacité de colonisation dans un modèle de souris bien établi. Alors que l'inoculation avec la souche de type sauvage a abouti à des souris fortement infectées par H. pylori, la souche mutante HpaA n'a pas été en mesure d'établir la colonisation. Ainsi, en combinant analyse protéomique et études in vivo, nous concluons que HpaA est essentiel pour la colonisation de H. pylori chez la souris.

H. pylori adhésine A (HpaA) est une lipoprotéine localisée en surface (7, 14, 20) (25) qui a été initialement décrite comme une adhésine liant l'acide sialique, mais les preuves à l'appui font toujours défaut. Il est reconnu par les anticorps provenant d'individus infectés par H. pylori (23, 39), et l'expression de la protéine HpaA s'est précédemment avérée être hautement conservée parmi les isolats de H. pylori (9, 39). En outre, les études génomiques (2, 32) ne montrent aucune homologie de séquence significative de HpaA avec d'autres protéines connues. Pris ensemble, cela fait de HpaA un candidat putatif comme antigène vaccinal contre l'infection à H. pylori.

Dans cette étude, nous avons construit un mutant HpaA dans la souche 1 (SS1) de H. pylori Sydney adaptée à la souris pour examiner le rôle de HpaA dans la colonisation. En raison de la co-transcription, les mutations géniques construites ont le potentiel de provoquer des effets polaires, c'est-à-dire d'inhiber l'expression de gènes en aval dans un opéron. De plus, il a été démontré que la suppression d'un gène peut affecter d'autres gènes de manière imprévue (30). Ainsi, lors de l'étude d'un mutant, l'analyse protéomique offre une méthode pratique pour surveiller les changements dans l'expression des protéines sans connaissance préalable de ce que ces changements pourraient être.

Le premier objectif de cette étude était d'examiner le profil protéique global, y compris l'expression protéique des gènes situés en aval de hpaA, de la souche SS1 adaptée à la souris et de son mutant HpaA isogénique. Ceci a été réalisé par une approche protéomique où des extraits de cellules entières de la bactérie ont été comparés par analyse DIGE. Nous avons également combiné l'analyse du fractionnement subcellulaire et une analyse par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (SDS) -sulfate de sodium unidimensionnel (PAGE) avec nano-LC par transformée de Fourier (FT) résonance cyclotronique ionique (ICR) (FT-ICR) MS et tandem MS (MS / MS) afin de comparer les profils OMP des souches SS1 sauvage et mutante. Pour déterminer si HpaA est essentiel à la survie chez l'hôte, les souris ont été infectées par H. pylori SS1 ou la souche mutante HpaA, et les niveaux de colonisation

MATÉRIAUX ET MÉTHODES
Construction de SS1 mutant SS1 hpaA-négatif / déficient (ΔhpaA).
Le mutant hpaA a été construit à l'origine dans la souche H.pylori CCUG 17874 par une amplification en deux étapes aboutissant à une délétion de 450 pb du gène hpaA (aimablement fournie par P. Doig et al., Astrazeneca Research Center, Boston, MA) et insertion d'une cassette de kanamycine de 1,4 kb (25). La mutation a été transférée de H. pylori CCUG 17874 à la souche SS1 adaptée à la souris par transformation naturelle. Cinq transformants résistants à la kanamycine ont été analysés par PCR avec deux amorces spécifiques de HpaA (amorce directe, 5'-GGCGTAGAAATGGAAGCG-3 '; amorce inverse, 5'-CCCAAGCTTCATCAGCCCTTAAATACACG-3') (21) pour confirmer que la cassette de kanamycine a été insérée dans le gène hpaA, résultant en un produit de PCR plus grand que celui de la souche SS1 de type sauvage. L'un des transformants avec l'insertion correcte a été en outre caractérisé par SDS-PAGE et immunoblot avec l'anticorps monoclonal HP30-1: 1: 6, spécifique de HpaA (9). Cette souche, SS1 (ΔhpaA), était négative dans l'immunoblot.

Souches et conditions de culture.
Les souches de H. pylori adaptées à la souris SS1 (CagA + VacA + Ley) (19) et SS1 (ΔhpaA) ont été utilisées dans toutes les expériences et stockées à -70 ° C comme cultures mères. Pour la préparation des antigènes de SS1 et SS1 (ΔhpaA), les bactéries ont été cultivées sur des plaques d'agar Colombia-Iso jusqu'à confluence pendant 3 jours dans des conditions microaérophiles (10% CO2, 6% O2 et 84% N2). SS1 (ΔhpaA) a été cultivé de la même manière que SS1 tout au long de l'expérience, à l'exception des cultures complétées avec 25 μg / ml kanamycine.

Courbes de croissance.
SS1 et SS1 (ΔhpaA) ont d'abord été cultivés sur des plaques Colombia-Iso jusqu'à confluence pendant 2 à 3 jours, puis remis en suspension dans 2 ml de bouillon Brucella (Difco Laboratories) à une densité optique à 600 nm (OD600) de 0,3 (1,5 × 109 bactéries / ml). Seize souris femelles C57BL / 6 ont été infectées par voie orale avec environ 109 CFU de H. pylori SS1 ou SS1 (ΔhpaA) dans un bouillon Brucella sous anesthésie (Isoflurane; Abbott Scandinavia Ab, Solna, Suède) comme décrit précédemment (27).

Détection de H. pylori SS1 (type sauvage) et SS1 (ΔhpaA) chez des souris infectées. (i) Culture quantitative.
La cinétique de SS1 dans la colonisation des souris a été bien caractérisée, montrant une colonisation stable entre 2 et 8 semaines d'infection (27). Pour déterminer la cinétique de colonisation par SS1 (ΔhpaA) chez la souris, les animaux ont été tués à divers moments après l'infection (3 jours, 3 semaines et 8 semaines). Les estomacs ont été prélevés et lavés avec une solution saline tamponnée au phosphate pour éliminer les résidus alimentaires. Une moitié de l'estomac a été utilisée pour la culture quantitative comme décrit précédemment (27), et l'autre moitié a été utilisée pour la détection de gènes spécifiques de H. pylori par PCR. Les homogénats d'estomac des souris infectées par SS1 (ΔhpaA) ont été cultivés sur des plaques de sang Skirrow à la fois avec et sans kanamycine pour examiner si elles avaient perdu leur résistance aux antibiotiques pendant l'infection gastrique.

RÉSULTATS
Comparaison des principaux composants du protéome dans les souches de H. pylori SS1 et SS1 (ΔhpaA).
Pour identifier qu'aucun changement d'expression de protéine spécifique n'avait suivi la construction du mutant HpaA, nous avons analysé le protéome de la souche SS1 de H. pylori et son mutant isogénique par le système DIGE basé sur 2-DE. En utilisant un tampon de lyse cellulaire compatible avec la technologie DIGE et une focalisation isoélectrique à un intervalle de pH de 3 à 10, plus de 800 taches protéiques distinctes de chaque échantillon dans les quatre répliques ont été détectées par le logiciel DeCyder et une correction manuelle ultérieure. L'analyse des profils d'expression dans la souche SS1 et le mutant SS1 (ΔhpaA) a abouti à l'identification d'un petit nombre de spots (13) avec un niveau significativement changé (P <0,05). Parmi ces spots, huit se sont avérés être régulés à la baisse et cinq spots ont été régulés à la hausse dans le mutant SS1 (ΔhpaA) (Fig. (Fig.1) .1). Pour l'identification des protéines, un gel préparatif a été coloré avec du rubis Sypro, et les taches ont été digérées dans un gel et analysées par nano-LC FT-ICR MS et MS / MS. Nous avons identifié avec succès les protéines présentées dans le tableau Tableau 1.1. Notamment, le facteur déclencheur codé par le gène tig situé en aval de hpaA a montré des niveaux d'expression similaires dans les deux souches (Fig. (Fig. 11 et et 2) .2). Cependant, Omp18 (HP0796) n'a été détecté ni dans la souche de type sauvage ni dans le mutant. Ainsi, pour s'assurer que la perturbation du gène hpaA n'avait pas affecté la transcription de son gène en aval, omp18, une RT-PCR spécifique à omp18 a été réalisée sur SS1 et la souche mutante SS1 (ΔhpaA), ce qui a montré que Omp18 était transcrit en les deux souches (données non présentées).

Détection de bactéries chez les souris infectées.
La colonisation de H. pylori a été détectée à la fois par culture quantitative et par PCR spécifique de H. pylori. Pour évaluer le modèle de colonisation pour SS1 (ΔhpaA), les souris ont été infectées avec SS1 (ΔhpaA) ou SS1 comme référence, puis tuées à divers moments allant de 3 jours à 2 mois. Les souris infectées par SS1 ont montré une colonisation massive à tous les moments étudiés, mais les bactéries n'ont pas pu être détectées dans l'estomac des souris infectées par SS1 (ΔhpaA) soit par culture (Fig. (Fig.5) 5), soit par H. pylori PCR spécifique à tout moment (données non présentées). Pour vérifier que SS1 (ΔhpaA) n'avait pas perdu sa résistance à la kanamycine lors de la colonisation dans l'estomac, les bactéries ont été cultivées sur des plaques avec et sans kanamycine. Cependant, aucune bactérie n'a pu être détectée après culture sur des plaques sans kanamycine non plus (données non présentées).

DISCUSSION
De nombreux facteurs de colonisation et de virulence ont été évalués comme antigènes protecteurs dans des études d'immunisation sur des modèles animaux (17, 22). Pour qu'une protéine bactérienne soit considérée comme un antigène de vaccin candidat, elle doit de préférence être conservée (c'est-à-dire présente dans toutes les souches), sécrétée ou localisée en surface et immunogène (c'est-à-dire capable de stimuler le système immunitaire). HpaA remplit tous ces critères; le gène codant pour HpaA est présent et exprimé par tous les isolats de H. pylori (9, 39), indiquant qu'il est intéressant pour la bactérie. En outre, les sujets infectés par H. pylori développent des réponses anticorps sériques contre HpaA, qui diminuent après l'éradication de la bactérie (23, 37), et HpaA induit la maturation et la présentation de l'antigène des cellules dendritiques, montrant son immunogénicité (36). De plus, il a été montré que HpaA est exprimé à la fois intracellulaire et sur la surface bactérienne (20, 25).

Pour étudier l'importance de HpaA dans l'infection à H. pylori, une mutation précédemment décrite de HpaA (25) a été introduite dans la souche SS1 adaptée à la souris, et la souche mutante a été testée pour sa capacité de colonisation etimmunogénicité dans un modèle animal bien établi.

Afin de vérifier que la mutation n'avait causé aucun dommage sur les gènes en aval ou les mutations du second site, nous avons effectué une analyse DIGE 2-D pour examiner le schéma d'expression protéique global de la souche SS1 de H. pylori. Toutes les taches protéiques détectées dans la souche de type sauvage, à l'exception de HpaA, ont été trouvées dans la souche mutante. Cependant, 13 spots correspondant à 11 protéines uniques ont montré de petits changements dans les niveaux d'expression chez le mutant par rapport à la souche de type sauvage; parmi celles-ci, sept protéines étaient régulées à la baisse et quatre protéines étaient régulées à la hausse. Ces protéines identifiées ne semblent pas liées ni au niveau génétique ni au niveau fonctionnel. De plus, il a été montré que des changements mineurs du niveau d'expression des protéines se produisent normalement au sein d'une souche bactérienne (35) (E. Carlsohn et al., Données non publiées). La découverte la plus importante dans l'analyse DIGE du type sauvage et de son mutant isogénique était que le facteur déclencheur codé par le gène tig situé en aval de hpaA présentait des niveaux d'expression similaires dans les deux souches.

Il est bien connu que les OMP ont tendance à être discriminées dans le 2-DE standard affichant un extrait cellulaire total. Cela est dû à la fois à une faible solubilité et à de faibles niveaux d'expression des protéines d'intérêt, et il est donc important de concevoir une procédure d'isolement appropriée pour cette espèce protéique. Nous avons effectué un fractionnement subcellulaire des OMP en combinaison avec une analyse PAGE unidimensionnelle et des analyses nano-LC FT-ICR MS et MS / MS de peptides tryptiques. En utilisant cette nouvelle approche, nous avons identifié plus de 20 protéines de membrane externe et 8 protéines associées aux flagelles dans les deux souches étudiées. Toutes les OMP présentes dans la souche de type sauvage, à l'exception de HpaA, ont également été exprimées dans la souche mutante. La co-transcription de hpaA et du gène en aval omp18 a été précédemment décrite (20). Il était donc intéressant d'étudier l'expression du produit du gène omp18 dans le mutant HpaA construit pour étudier les effets polaires possibles sur les gènes environnants chez le mutant. Malheureusement, la protéine Omp18 n'a été détectée dans aucune des souches. Cependant, l'analyse RT-PCR de l'ARNm de omp18 des souches de type sauvage et mutantes a clairement montré que omp18 était transcrit dans les deux souches, indiquant que la perturbation de hpaA n'avait aucun effet polaire sur ses gènes en aval (données non présentées). De plus, à notre connaissance, la protéine Omp18 n'a jamais été détectée, ce qui suggère qu'elle pourrait ne pas être traduite mais qu'elle pourrait être uniquement présente au niveau de l'ARNm. Comme aucune différence majeure entre les deux souches n'a pu être détectée, nous avons procédé à un modèle animal pour évaluer l'importance physiologique de HpaA.

Des études in vivo ont montré que si les souris infectées par la souche SS1 de type sauvage étaient fortement colonisées, son mutant isogénique n'a pas réussi à coloniser les souris à tous les moments examinés. Ainsi, le fait que le mutant n'ait pas montré de différences significatives de croissance dans des conditions de laboratoire suggère que le phénotype observé est strictement in vivo dépendant.

HpaA a été à l'origine signalé comme une hémagglutinine putative liant le N-acétylneuraminyllactose, et plusieurs études ont tenté d'élucider la fonction de HpaA dans des études d'adhésion in vitro, mais les résultats ne sont pas concluants. Par exemple, la liaison bactérienne aux lignées cellulaires gastriques in vitro n'a pas été affectée par un gène hpaA inactivé (25). Cependant, il a été démontré que les lignées de cellules épithéliales répondent assez différemment aux stimulations bactériennes par rapport aux cellules épithéliales fraîchement isolées (4). En outre, la délétion du gène hpaA n'a pas influencé le schéma de reconnaissance des glycosphingolipides des bactéries, tel qu'évalué par la liaison des bactéries à des glycosphingolipides de liaison à H. pylori précédemment identifiés sur des chromatogrammes en couche mince (1). Ainsi, la souche SS1 parente et le mutant knockout HpaA se sont liés au lactosylcéramide, au gangliotétraosylcéramide, au lactotétraosylcéramide et aux glycosphingolipides à terminaison Leb (S. Teneberg et al., Données non publiées). On peut donc se demander si HpaA lui-même médie directement la liaison au récepteur ou s'il est impliqué dans la facilitation du transport et du pliage de l'adhésine, ou s'il exerce des fonctions de régulation. Le rôle de HpaA doit être élucidé dans des investigations plus poussées.

En conclusion, nous avons montré que la perturbation du gène codant pour HpaA n'induisait pas de différences majeures dans le schéma d'expression des protéines chez le mutant par rapport à la souche de type sauvage. Nous avons également démontré que HpaA est essentiel pour la colonisation bactérienne de la muqueuse gastrique de souris, établissant pour la première fois un rôle physiologique de HpaA in vivo.

Abstrait
L'infection par le pathogène gastrique humain Helicobacter pylori peut entraîner une gastrite chronique, un ulcère peptique et un cancer gastrique. Toutes les souches de H. pylori expriment la protéine HpaA localisée en surface, un candidat prometteur pour un vaccin contre l'infection à H. pylori. Pour étudier leimportance physiologique de HpaA, une mutation du gène hpaA a été introduite dans une souche de H. pylori adaptée à la souris. Pour justifier que l'interruption du gène hpaA n'a provoqué aucun effet polaire des gènes en aval ou était associée à une seconde mutation de site, les profils d'expression protéique des souches mutantes et de type sauvage ont été caractérisés par deux approches protéomiques différentes. L'analyse par électrophorèse bidimensionnelle différentielle en gel d'extraits de cellules entières et le fractionnement sous-cellulaire combiné à la chromatographie nano-liquide - La spectrométrie de masse par résonance cyclotronique ionique à transformée de Fourier pour le profilage des protéines de la membrane externe n'a révélé que des différences mineures dans le profil protéique entre le mutant et la nature -types souches. Par conséquent, la souche mutante a été testée pour sa capacité de colonisation dans un modèle de souris bien établi. Alors que l'inoculation avec la souche de type sauvage a abouti à des souris fortement infectées par H. pylori, la souche mutante HpaA n'a pas été en mesure d'établir la colonisation. Ainsi, en combinant analyse protéomique et études in vivo, nous concluons que HpaA est essentiel pour la colonisation de H.