ПРОДУКТЫ

ТРИПСИН

Трипсин представляет собой сериновую протеазу, которая играет важную роль в гидролизе и всасывании белков у млекопитающих.
При преобразовании из своего зимогена трипсиногена трипсин доступен в виде активной формы пептидной гидролазы, расщепляющей пептидные цепи, главным образом на карбоксильной стороне аминокислот лизина или аргинина.
Трипсин содержит нуклеофильный остаток Ser в активном центре фермента, который атакует карбонильную часть пептидной связи субстрата с образованием промежуточного соединения ацил-фермент.
Этой нуклеофильной атаке способствует каталитическая триада, состоящая из гистидина-57, аспартата-102 и серина-195.
Трипсин также содержит оксианионную дырку, которая стабилизирует отрицательный заряд карбонильного атома кислорода, образующийся в результате расщепления пептидных связей.
Терапевтические формы трипсина получают из очищенных экстрактов свиной или бычьей поджелудочной железы и предназначены для улучшения пищеварения при пероральном введении.

Трипсин — природный протеолитический фермент, обнаруженный в пищеварительном тракте млекопитающих.
Трипсин используется в клинической практике в сочетании с бромелайном и рутозидами при лечении некоторых воспалительных состояний.

КАС: 9002-07-7
Номер Европейского Сообщества (ЕС): 232-650-8

Трипрар, трипсин, трипсин, трипсевас, трипсин TPCK, α- и β-трипсин, трипсин, поджелудочная железа крупного рогатого скота, трипсин поджелудочной железы свиньи, трипсин из поджелудочной железы свиньи, трипсин бычий, класс USP, раствор трипсин-ЭДТА 1X, трипсин из поджелудочной железы человека, Трипсин TPCK, базовый поджелудочной железы, Трипсин из бычьей поджелудочной железы, Тррпсин, последовательность, рекомбинантный, Тррпсин, последовательность, рекомбинантный, Трипсин, рекомбинантный из E.coli, Рекомбинантный трипсин, из E.coli, ТРИПСИН, ПРОТЕОМИЧЕСКАЯ СЕКВЕНЦИОННАЯ СТЕПЕНЬ, трипсин типа ix из свиньи поджелудочная железа, рекомбинантный человеческий трипсин из E.coli, трипсин, обработанный TPCK, поджелудочная железа крупного рогатого скота, трипсин, обработанный DPCC, поджелудочная железа крупного рогатого скота, таблетки трипсина 1 мг с буферными солями, трипсин типа xii-S из поджелудочной железы крупного рогатого скота, 1X раствор трипсина, протестированный на клеточной культуре , Трипсин, степень иссечения, поджелудочная железа крупного рогатого скота, 10-кратный раствор трипсина в клетках* протестирован в культуре, трипсин tpck обработан из * поджелудочной железы крупного рогатого скота, Трипсин йодирования класса, поджелудочная железа человека, раствор клеток трипсина-ЭДТА* протестирован в культуре, Секвенирование рекомбинантного трипсина из E.coli , раствор трипсина-ЭДТА (1X)*проверено на клеточной культуре, dpcc трипсина типа xi, обработанное *поджелудочной железой крупного рогатого скота, раствор трипсина-ЭДТА для культуры эндотелиальных*клеток, трипсин из клеток поджелудочной железы свиньи*проверено на культуре, РАСТВОР ТРИПСИНА-ЭДТА ДЛЯ ЭНДОТЛИАЛЬНОСТИ*CE LL КУЛЬТУРЫ

Трипсин — это фермент в первом отделе тонкой кишки, который начинает переваривание белковых молекул, разрезая длинные цепи аминокислот на более мелкие кусочки.
Трипсин — сериновая протеаза из надсемейства клана PA, обнаруженная в пищеварительной системе многих позвоночных животных, где она гидролизует белки.
Трипсин образуется в тонком кишечнике при активации его проферментной формы — трипсиногена, вырабатываемого поджелудочной железой.
Трипсин разрезает пептидные цепи преимущественно на карбоксильной стороне аминокислот лизина или аргинина.
Трипсин используется во многих биотехнологических процессах.
Этот процесс обычно называют протеолизом трипсиногена или трипсинизацией, а белки, которые были переварены/обработаны трипсином, считаются трипсинизированными.

Трипсин был открыт в 1876 году Вильгельмом Кюне.
Хотя во многих источниках говорится, что Кюне назвал трипсин от древнегреческого слова «трипсис», обозначающего растирание, поскольку фермент был впервые выделен путем протирания поджелудочной железы стеклянным порошком и спиртом, на самом деле Кюне назвал трипсин от древнегреческого слова «трипто», которое означает «я ломаюсь» или «я распадаюсь на части».

Трипсин представляет собой фермент сериновой протеазы, гидролизующий белки на карбоксильной стороне лизина или аргинина.
Трипсин активирует PAR2 и PAR4.
Трипсин индуцирует слияние межклеточных мембран при инфекции PDCoV за счет взаимодействия S-гликопротеина PDCoV и pAPN.
Трипсин также способствует пролиферации и дифференцировке клеток.
Трипсин можно использовать в исследованиях заживления ран и нейрогенного воспаления.

Трипсин — природный протеолитический фермент, обнаруженный в пищеварительном тракте млекопитающих.
Клинически используется в сочетании с бромелайном и рутозидами при лечении некоторых воспалительных состояний.

Трипсин или сериновая протеаза 1 представляет собой глобулярный белок среднего размера, который функционирует как сериновая протеаза поджелудочной железы.
Этот фермент гидролизует связи, расщепляя пептиды на С-концевой стороне аминокислотных остатков лизина и аргинина.
Трипсином также было показано, что расщепление не произойдет, если на карбоксильной стороне сайта расщепления имеется остаток пролина.
Трипсин был впервые открыт в 1876 году Куном, исследовавшим протеолитическую активность фермента.
В 1931 году фермент был очищен кристаллизацией Норотропом и Куницем, а позже, в 1974 году, была определена трехмерная структура трипсина.
На протяжении 1990-х годов была открыта роль трипсина в наследственном панкреатите и вызывающей его мутации.
Сегодня трипсин используется при разработке клеточных и тканевых протоколов, а также в медицинской сфере для определения роли трипсина при заболеваниях поджелудочной железы.

Трипсин (EC 3.4.21.4) представляет собой сериновую протеазу из суперсемейства клана PA, обнаруженную в пищеварительной системе многих позвоночных животных, где она гидролизует белки.
Трипсин вырабатывается в поджелудочной железе в виде неактивной протеазы трипсиноген.
Трипсин расщепляет пептидные цепи главным образом на карбоксильной стороне аминокислот лизина или аргинина, за исключением случаев, когда за любой из них следует пролин.
Трипсин используется во многих биотехнологических процессах.
Этот процесс обычно называют протеолизом трипсина или трипсинизацией, а белки, которые были переварены/обработаны трипсином, считаются трипсинизированными.

Катионный трипсин или Трипсин-1 экспрессируется в поджелудочной железе.
Трипсин расщепляет связи, включающие лизин и аргинин.

Анионный трипсин или Трипсин-2 экспрессируется в поджелудочной железе.

Мезотрипсин или Трипсин-3 экспрессируется в головном мозге и поджелудочной железе и устойчив к обычным ингибиторам трипсина.

Трипсиноген является предшественником или ферментом трипсина.
Зимогены представляют собой предшественники ферментов, которые производятся и секретируются в лизосомах клетки.
Зимогены не активны до тех пор, пока не пройдут химический процесс, такой как гидролиз, расщепление или другие расщепления, которые обнажают активный центр.
Предшественник зимогена необходим для того, чтобы предотвратить разрушение клеточных белков и позволить ферменту находиться в активном состоянии только в соответствующих условиях.
Трипсиноген специфически вырабатывается экзокринными клетками поджелудочной железы.
Поджелудочная железа секретирует три изоформы трипсиногена.
Предшественник активируется только тогда, когда достигает просвета тонкой кишки.
Эта активация происходит с помощью энтеропептидазы, и после активации трипсин стимулирует образование большего количества трипсиногена.
Структура бычьего трипсиногена показана на рисунке справа.
Трипсин имеет множество применений, поскольку его легко очищать в больших количествах.
Фермент трипсин часто используется в исследовательских целях для расщепления белков и последующей идентификации полученных пептидов с помощью масс-спектрометрии.
Трипсин имеет множество применений в медицинской сфере, например, для растворения тромбов и лечения воспалений.
Другие применения включают его использование для предварительного переваривания детского питания, снятия отпечатков пальцев и секвенирования, а также мониторинга окружающей среды.

Трипсин — сериновая протеаза пищеварительной системы человека и животных.
Основная функция этого фермента — гидролизовать белки на более мелкие пептиды или даже аминокислоты.
Трипсин и другие пищеварительные протеазы, такие как химотрипсин, отвечают за переваривание пищевого белка в тонком кишечнике.
Эта протеолитическая функция трипсина широко используется в химии белков, протеомике и исследованиях в области питания.
На эту функцию влияют источники фермента и факторы окружающей среды, такие как pH, температура и присутствие ингибиторов трипсина в ферментативной реакционной среде.
Трипсин используется в пищевой промышленности для улучшения таких функциональных свойств, как растворимость, эмульгирование, пенообразование и гелеобразующие свойства пищевых белков, для улучшения усвояемости белков овощей и семян.
Трипсин используется для снижения концентрации аллергенов в некоторых продуктах питания и для производства белковых гидролизатов и биоактивных пептидов, которые используются в детских смесях и для людей с особыми проблемами со здоровьем, такими как гипертония.
В исследованиях в области пищевой промышленности трипсин используется для секвенирования пищевых белков и определения усвояемости пищевых белков in vitro.
В сочетании с бромелайном и рутином трипсин применяют при остеоартрите.
Трипсин используется для удаления некротических тканей и остатков во время очистки ран и язв.
Добавки трипсина можно использовать для удаления мертвых клеток тканей, оставшихся после травмы, инфекции или хирургических процедур, позволяя расти новым клеткам кожи или тканей.

Характеристики
Температура плавления: 115°С.
Плотность: 1,37 [при 20 ℃ ]
давление пара: 0 Па при 25 ℃
температура хранения: -20°C
растворимость: Восстановить в водном буфере
форма: лиофилизированный порошок
pka: pK1:6,25 (25°C,μ=0,1)
цвет: Белый порошок
Запах: Без запаха
Растворимость в воде: растворим в воде (10 мг/мл), фосфатных буферах (10 мг/мл) и сбалансированных солевых растворах (1 мг/мл).
Мерк: 13,9865
Стабильность: Стабильная. Несовместим с сильными окислителями.
LogP: -1,3 при 20 ℃

Функция
В двенадцатиперстной кишке трипсин катализирует гидролиз пептидных связей, расщепляя белки на более мелкие пептиды.
Затем пептидные продукты гидролизуются до аминокислот с помощью других протеаз, что делает их доступными для всасывания в кровоток.
Триптическое переваривание является необходимым этапом всасывания белков, поскольку белки обычно слишком велики, чтобы всасываться через слизистую оболочку тонкой кишки.

Трипсин вырабатывается в поджелудочной железе в виде неактивного зимогена трипсиногена.
Когда поджелудочная железа стимулируется холецистокинином, он затем секретируется в первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку) через проток поджелудочной железы.
Попадая в тонкий кишечник, фермент энтерокиназа (также называемый энтеропептидазой) активирует трипсиноген в трипсин путем протеолитического расщепления.
Затем трипсин активирует дополнительный трипсин, химотрипсин и карбоксипептидазу.

Приложение
Для расщепления пептидов трипсином используйте соотношение трипсин:пептид примерно от 1:100 до 1:20.
Обычно этот продукт используется для удаления прилипших клеток с поверхности культуры.
Концентрация трипсина, необходимая для отделения клеток от субстрата, зависит прежде всего от типа клеток и возраста культуры.
Трипсины также использовались для ресуспендирования клеток во время клеточной культуры, в протеомных исследованиях переваривания белков и в различных гелевых расщеплениях.
Дополнительные применения включают оценку кристаллизации с помощью мембранных методов, а также исследование, направленное на определение того, что скорость и выход сворачивания белка могут быть ограничены наличием кинетических ловушек.

Биохимические/физиолические действия
Трипсин расщепляет пептиды на С-концевой стороне остатков лизина и аргинина.
Скорость гидролиза этой реакции замедляется, если кислотный остаток находится по обе стороны от сайта расщепления, и гидролиз останавливается, если остаток пролина находится на карбоксильной стороне сайта расщепления. Оптимальный pH для активности трипсина составляет 7-9.
Трипсин также может расщеплять сложноэфирные и амидные связи синтетических производных аминокислот.
ЭДТА добавляется в растворы трипсина в качестве хелатирующего агента, нейтрализующего ионы кальция и магния, которые затемняют пептидные связи, на которые действует трипсин.
Удаление этих ионов увеличивает ферментативную активность.

Ингибиторы сериновой протеазы, включая DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF и апротинин, среди прочих, ингибируют трипсин.

Компоненты
Трипсин состоит из одноцепочечного полипептида из 223 аминокислотных остатков, образующегося путем удаления N-концевого гексапептида от трипсиногена, который расщепляется по пептидной связи Lys-lle.
Последовательность аминокислот сшита шестью дисульфидными мостиками.
Это нативная форма трипсина, бета-трипсин.
БЕТА-трипсин может подвергаться автолизу, расщепляя остаток Lys-Ser, с образованием альфа-трипсина.
Трипсин является членом семейства сериновых протеаз.

Механизм
Ферментативный механизм подобен механизму других сериновых протеаз.
Эти ферменты содержат каталитическую триаду, состоящую из гистидина-57, аспартата-102 и серина-195.
Эту каталитическую триаду раньше называли системой реле заряда, подразумевая отрыв протонов от серина к гистидину и от гистидина к аспартату, но благодаря данным ЯМР, что образующаяся в результате алкоксидная форма серина будет иметь гораздо более сильное притяжение к протону, чем Является ли имидазольное кольцо гистидина, современные представления утверждают, что каждый серин и гистидин имеют фактически равную долю протона, образуя с ними короткие низкобарьерные водородные связи.
Таким образом, нуклеофильность серина активного центра увеличивается, что облегчает его атаку на амидный углерод во время протеолиза.
Ферментативная реакция, которую катализирует трипсин, термодинамически выгодна, но требует значительной энергии активации («кинетически невыгодна»).
Кроме того, трипсин содержит «оксианионную дырку», образованную атомами водорода основной цепи амида Gly-193 и Ser-195, которые посредством водородных связей стабилизируют отрицательный заряд, который накапливается на кислороде амида после нуклеофильной атаки на плоский амидный углерод со стороны кислород серина заставляет этот углерод принимать тетраэдрическую геометрию.
Такая стабилизация этого тетраэдрического интермедиата способствует снижению энергетического барьера его образования и сопровождается понижением свободной энергии переходного состояния.
Предпочтительное связывание переходного состояния является ключевой особенностью химии ферментов.

Отрицательный остаток аспартата (Asp 189), расположенный в каталитическом кармане (S1) трипсина, отвечает за привлечение и стабилизацию положительно заряженного лизина и/или аргинина и, таким образом, отвечает за специфичность фермента. Это означает, что трипсин преимущественно расщепляет белки на карбоксильной стороне (или «С-концевой стороне») аминокислот лизина и аргинина, за исключением случаев, когда любой из них связан с С-концевым пролином, хотя данные крупномасштабной масс-спектрометрии предполагают, что расщепление происходит даже с пролином.
Трипсин считается эндопептидазой, т.е. расщепление происходит внутри полипептидной цепи, а не по концевым аминокислотам, расположенным на концах полипептидов.

Трипсин был открыт в 1876 году Вильгельмом Кюне.
Хотя во многих источниках говорится, что Кюне назвал трипсин от древнегреческого слова «трипсис», поскольку фермент был впервые выделен путем протирания поджелудочной железы стеклянным порошком и спиртом, на самом деле Кюне назвал трипсин от древнегреческого слова «трипто», которое означает «Я ломаюсь» или «Я распадаюсь на части».

Характеристики
Человеческий трипсин имеет оптимальную рабочую температуру около 37 °C.
Напротив, атлантическая треска имеет несколько типов трипсинов, позволяющих пойкилотермным рыбам выжить при разных температурах тела.
Трипсины трески включают трипсин I с диапазоном активности от 4 до 65 °C (от 40 до 150 °F) и максимальной активностью при 55 °C (130 °F), а также трипсин Y с диапазоном активности от 2 до 30 °C ( от 36 до 86 °F) и максимальная активность при 21 °C (70 °F).

Как белок, трипсин имеет различную молекулярную массу в зависимости от источника.
Например, сообщается, что молекулярная масса трипсина из бычьего и свиного происхождения составляет 23,3 кДа.

На активность трипсина не влияет ингибитор фермента тозилфенилаланилхлорметилкетон, TPCK, который дезактивирует химотрипсин.

Трипсин следует хранить при очень низких температурах (от -20 до -80 °C), чтобы предотвратить аутолиз, которому также можно помешать хранение трипсина при pH 3 или использование трипсина, модифицированного восстановительным метилированием.
Когда pH возвращается к pH 8, активность возвращается.

Клиническое значение
Активация трипсина в результате протеолитического расщепления трипсиногена в поджелудочной железе может привести к ряду событий, вызывающих самопереваривание поджелудочной железы, что приводит к панкреатиту.
Одним из последствий аутосомно-рецессивного заболевания муковисцидозом является дефицит транспорта трипсина и других пищеварительных ферментов из поджелудочной железы.
Это приводит к заболеванию, называемому мекониевой непроходимостью кишечника, которое включает кишечную непроходимость (илеус) из-за слишком густого мекония, который обычно расщепляется трипсином и другими протеазами, а затем выделяется с калом.

Приложения
Трипсин имеется в поджелудочной железе в больших количествах и его довольно легко очистить.
Таким образом, трипсин широко используется в различных биотехнологических процессах.

В лаборатории тканевых культур трипсин используется для ресуспендирования клеток, прилипших к стенкам чашки для культуры клеток в процессе сбора клеток.
Некоторые типы клеток прилипают к стенкам и дну чашки при культивировании in vitro.
Трипсин используется для расщепления белков, удерживающих культивируемые клетки на чашке, чтобы клетки можно было удалить из чашек.

Трипсин также можно использовать для диссоциации рассеченных клеток (например, перед их фиксацией и сортировкой).

Трипсин можно использовать для расщепления казеина в грудном молоке.
Если к раствору сухого молока добавить трипсин, распад казеина приведет к тому, что молоко станет прозрачным.
Скорость реакции можно измерить, используя количество времени, необходимое для того, чтобы молоко стало прозрачным.

Трипсин обычно используется в биологических исследованиях во время протеомных экспериментов для переваривания белков в пептиды для масс-спектрометрического анализа, например, расщепления в геле.
Для этого особенно подходит трипсин, поскольку он обладает очень четко определенной специфичностью, поскольку гидролизует только те пептидные связи, в которых карбонильная группа представлена остатком аргинина или лизина.

Трипсин также можно использовать для растворения тромбов в микробной форме и лечения воспаления в панкреатической форме.

В еде

Коммерческие препараты протеаз обычно состоят из смеси различных ферментов протеаз, которая часто включает трипсин.
Эти препараты широко используются в пищевой промышленности:

- в качестве хлебопекарного фермента для улучшения обрабатываемости теста
- при экстракции приправ и ароматизаторов из растительных или животных белков и при производстве соусов
- для контроля образования аромата в сыре и молочных продуктах
- для улучшения текстуры рыбных продуктов
- для смягчения мяса
- при холодной стабилизации пива
- при производстве гипоаллергенных продуктов питания, где протеазы расщепляют специфические аллергенные белки до неаллергенных пептидов, например, протеазы используются для производства гипоаллергенного детского питания из коровьего молока, тем самым снижая риск развития аллергии на молоко у детей.

Трипсин представляет собой сериновую протеазу, которая специфически расщепляет карбоксильную сторону остатков лизина и аргинина.
Строгая специфичность трипсина необходима для идентификации белков, и он стал золотым стандартом расщепления белков до пептидов для дробовой протеомики.

Трипсин – это фермент, который помогает пищеварению.
Фермент – это белок, ускоряющий определенную биохимическую реакцию.
Трипсин находится в тонком кишечнике. Его также можно сделать из грибов, растений и бактерий.
Но обычно в коммерческих целях его изготавливают из поджелудочной железы домашнего скота.

Трипсин назначают людям, у которых не хватает ферментов, необходимых для пищеварения.

Трипсин также назначают в сочетании с бромелайном и рутином для лечения остеоартрита и многих других заболеваний, но убедительных научных доказательств, подтверждающих эти другие применения, нет.

Некоторые люди наносят трипсин непосредственно на раны и язвы, чтобы удалить омертвевшие ткани и улучшить заживление.

Трипсин удаляет омертвевшие клетки кожи (ткани) и позволяет здоровым тканям расти.
Трипсин в сочетании с другими ферментами, по-видимому, уменьшает воспаление и отек.