ТАННАСЕ

ТАННАЗА = ТАННИНАЦИЛГИДРОЛАЗА

Номер КАС: 9025-71-2
Номер ЕС: 232-804-4
Номер в леях: MFCD00212735

Танназа представляет собой фермент, гидролизующий танин, содержащий депсидные связи, такие как дубильная кислота и хлорогеновая кислота.
Танназа химически идентифицируется как ацилгидролаза танина со следующим регистрационным номером: EC 3.1.1.20 и CAS RN: 9025-71-2.
Танназа продуцируется негенетически модифицированным аспергиллом . oryzae с критериями, изложенными в Регламенте (ЕС) 1332/2008 по пищевым ферментам.

В пищевой промышленности танназа особенно эффективно улучшает качество чая (уменьшает горечь) и предотвращает помутнение чая из-за коацервации чайного танина.
Основные ферментативные реакции с участием танназы показаны ниже.
Помимо основной ферментативной активности, Tannase не содержит значительных уровней вспомогательной активности.

Танназа предназначена для производства напитков на основе чая (готовых к употреблению чаев, чайных экстрактов) и растительных экстрактов.
При использовании Tannase для других видов напитков попробуйте концентрацию от 0,01% до 0,2% при температуре от 30 до 40 ℃ в течение определенного периода времени, чтобы найти оптимальные условия.
Следует отметить, что при использовании танназа ионы трехвалентного железа в качестве ингибитора могут повлиять на результат.

Танназа разлагает галлатированные полифенолы чая на галловую кислоту и полифенолы, чтобы предотвратить соединение с кофеином, которое является причиной помутнения чая.
Танназа очищает любые сорта чая, но не меняет вкус.

Танназа катализирует гидролиз дубильной кислоты с образованием галловой кислоты и глюкозы.
Танназу получают путем глубинной ферментации выбранного штамма грибов с последующей очисткой, составлением рецептуры и сушкой .
Свойства танназы варьируются от вида к виду.

Танназа имеет молекулярную массу 46,5-90 кДа и существует в виде мономера, в то время как танназа из Rhodococcus sp. и L. plantarum содержит две субъединицы.
Пока что все танназы дрожжей и грибов являются гликопротеинами, но у бактерий, по-видимому, нет такой посттрансляционной модификации.

Танназа представляет собой кислый белок с оптимальным диапазоном pH 4,5-7,0.
Оптимальная температура для разных видов танназ различна, и оптимальная температура для большинства бактериальных танназ составляет от 30 до 40 °C.

При использовании в качестве субстрата метилгаллата и температуре реакции 30–40 °C сродство бактериальной танназы к субстрату (Km) из Selenomonas ruminantium и Enterobacter sp. составил 1,6 и 3,7 соответственно.
Более 28% бактериальной танназы требуют ионов металлов в качестве кофактора для стимуляции максимальной каталитической эффективности.

Также было обнаружено, что активность танназы B. subtilis танназа увеличивается в полярных протонных растворителях, таких как глицерин, изопропанол, этанол, метанол и изоамиловый спирт, в то время как бутанол , уксусная кислота и ацетон снижают активность танназы .
Танназа представляет собой светло-желтый порошок.

Цвет может варьироваться от партии к партии.
Интенсивность окраски не является показателем активности фермента.
Tannase имеет два известных домена и один известный активный сайт.

Танназу можно найти в растениях, бактериях и грибах, и она имеет разные цели в зависимости от организма , в котором содержится танназа .
Танназа также имеет множество целей для использования человеком.

Кристаллическая структура танназы незначительно варьируется в зависимости от наблюдаемого штамма, в данном случае мы рассматриваем штамм танназы SN35N, продуцируемый Lactobacillus plantarum .
В среднем молекулярная масса танназы находится в диапазоне 50-320 кДа .

Натуральный B. subtilis танназа состоит из 9,3% α-спирали, 33,6% параллельного β-листа, 17,2% β-витка и 39,9% случайного витка.
Конформация β играет доминирующую роль в активности танназы , а вторичная структура танназы строго зависит от ее микроокружения (температуры и рН).

Б. Субтилис Сканирующий зондовый микроскопический анализ (СЗМ) танназы показал, что танназа проявляет разную степень агрегации, структура похожа на круглую или овальную, размер разный, средний диаметр составляет 44 нм.
Кристаллическая структура танназы представляет собой небольшой пластинчатый кристалл.

Трехмерный структурный анализ L. plantarum танназа показала, что она имеет структуру α/β с 18 α-спиралями и 13 β-нитями.
Танназа (КФ 3.1.1.20) относится к классу гидролаз.

Танназа катализирует гидролиз дигаллата до галлата .
Систематическое название этого класса ферментов — таннин ацилгидролаза .
Другие широко используемые названия включают танназу S и таннин- ацетилгидролазу .

Танназа представляет собой естественную адаптивную внутриклеточную/внеклеточную индуцибельную гидролазу, относящуюся к суперсемейству эстераз.
Танназа может быть получена из растений, животных и микроорганизмов, но танназа микробного происхождения более распространена, поскольку стабильность танназы выше, чем у растительных и животных источников.

Фермент танназа (КФ 3.1.1.20) катализирует следующую реакцию:
дигаллат + H2O = 2 галлат
Танназа является ключевым ферментом в деградации галлотанинов и эллагицитанинов , двух типов гидролизуемых танинов.

В частности, танназа катализирует гидролиз сложноэфирных и депсидных связей гидролизуемых танинов с высвобождением глюкозы и галловой или эллаговой кислоты.
Танназа принадлежит к семейству гидролаз, особенно к тем, которые действуют на карбоксильные эфирные связи.

Систематическое название – таннин ацилгидролаза .
Другие широко используемые названия включают танназу S и таннин- ацетилгидролазу .
Один из способов, которым структура танназы связана с ее функцией, включает петлевую структуру, называемую лоскутом.
Клапан соединяет листы β8 и β9 и располагается под каталитической триадой.

Из-за низкой плотности электронов эта структура очень гибкая.
Благодаря гибкости танназы лоскут лучше направляет субстрат при попадании фермента и помогает усилить общее связывание комплекса за счет образования дополнительных взаимодействий с другими частями субстрата.

Танназа присутствует в микроорганизмах, растениях и животных.
Однако микроорганизмы в основном используются для коммерческого производства.
Полный список микроорганизмов, продуцирующих танназу , предоставлен Chávez-González et al., (2012).

Из приведенного ими списка видов продуцентов танназ можно сделать вывод, что, что интересно, грибы, дрожжи и бактерии являются доминирующими группами среди микроорганизмов.
Среди грибов основными группами являются Aspergilli и Penicillia , хотя продуцентами танназы известны 20 различных родов грибов .

На сегодняшний день 27 видов Aspergillus , 24 вида Penicillium , 4 вида Trichoderma и 3 вида Fusarium зарегистрированы как продуценты танназы .

Среди бактерий около 21 различных родов известны как продуценты танназы , и среди них доминирующими группами являются Lactobacilli (13 видов), за которыми следуют Pediococcus (4 вида), Serratia (3 вида), Leuconostoc (2 вида), Pantonea (2 вида) Streptococcus (2 вида) среди прочих.

Ранние исследования были сосредоточены на скрининге микроорганизмов, доступных в качестве исходной культуры из центров сбора культур, которые в основном получали микроорганизмы из почвы.

Однако более поздние исследователи разработали среду, специфичную для скрининга продуцентов танназы из природной среды, такой как лесная подстилка, человеческие фекалии , ферментированные продукты, экскременты овец, сточные воды кожевенных заводов, сточные воды оливкового завода и т. д.

Танназа расщепляет эфирные и депсидные связи в таких гидролизуемых дубильных веществах, как дубильная кислота и чебулиновая кислота.
Танназа также действует на сложноэфирные и депсидные связи в метилгаллате и м- дигалловой кислоте соответственно.

Танназа гидролизует только те субстраты, которые содержат не менее двух фенольных ОН-групп в кислотном компоненте.
Этерифицированная группа СООН должна находиться на окисленном бензольном кольце и не должна находиться в орто -положении к одной из групп ОН.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ и ПРИМЕНЕНИЕ TANNASE:
- Производство галловой кислоты важно в фармацевтической промышленности, так как она необходима для создания триметоприма, антибактериального препарата.
- Танназа также имеет множество применений в пищевой промышленности и производстве напитков.

- В частности, танназа используется для улучшения вкуса еды и напитков, либо путем удаления мутности из соков или вин, либо удаления горького вкуса танинов в некоторых продуктах питания и напитках, таких как желудевое вино.

- Кроме того, поскольку танназа может разрывать эфирные связи глюкозы с различными кислотами ( хебулиновой , галловой и гексагидрофеновой ), танназу можно использовать в процессе созревания плодов.

- Танназа также используется в пищевой, кормовой, фармацевтической и химической промышленности для производства галловой кислоты, растворимого чая, прохладительных напитков со вкусом кофе и вин « Акрон ».

того, танназа используется для осветления пива и сока, улучшения вкуса вина и изготовления корма для животных.
- Танназа участвует в созревании плодов, разрывая эфирные связи глюкозы с хебулиновой , галловой и гексагидрофеновой кислотами.

- В химической промышленности танназу можно использовать для подготовки аналитических зондов, определения структуры встречающихся в природе сложных эфиров галловой кислоты, обнаружения раковых клеток и очистки сточных вод, содержащих дубильные вещества, в оливковом масле и кожевенной промышленности.

- Танназа используется для улучшения вкуса и снижения чувствительности фенолов в чае к помутнению, устранения антипитательного эффекта танинов в кормах, превращения танина в лучший дубильный агент для кожи и так далее.

- Танназа также может быть использована для производства негаллоилированных катехины .

- Танназа находит широкое применение в различных отраслях промышленности, включая продукты питания и напитки, корма, косметику и кожу, где фермент играет роль танназы, модифицируя танины желаемым образом.

ФУНКЦИЯ ТАННАЗА:
РАСТЕНИЯ:
Танназа функционирует по-разному в клетке в зависимости от наблюдаемого организма.
Во многих растениях танназа используется для производства дубильных веществ, которые содержатся в листьях, древесине и коре.

Производство дубильных веществ в растениях необходимо для защиты от травоядных , поскольку они вызывают сильный неприятный вкус.
Дубильные вещества считаются вторичными метаболитами в растениях.
Следовательно, их продукция танназой не играет прямой роли в первичном метаболизме растений.

МИКРООРГАНИЗМЫ:
С другой стороны, у многих микроорганизмов танназа служит другой цели.
В клетке танназа является ключевым ферментом деградации галлотанинов .
Это важно, потому что некоторые микроорганизмы используют танназу для расщепления гидролизуемых дубильных веществ, таких как галлотаннины , с образованием глюкозы и галловой кислоты.

Эти побочные продукты образуются в результате гидроксилирования ароматического ядра танина с последующим расщеплением кольца.
Глюкоза и галловая кислота затем могут быть легко преобразованы в метаболиты (т.е. пируват, сукцинат и ацетилкоэнзим А), которые можно использовать в цикле Кребса.
Конкретные микроорганизмы, которые используют танназу таким образом, включают виды Pseudomonas.

РАСПРОСТРАНЕНИЕ ВИДОВ:
Танназа присутствует в разнообразной группе микроорганизмов, включая бактерии рубца. Было обнаружено, что многие другие виды бактерий продуцируют танназу , будучи выделенными из различных типов сред, таких как почва, сточные воды, компост, лесная подстилка, фекалии, напитки, соленья и т. д.

Бактерии и археи с танназной активностью обнаружены в родах: Achromobacter , Atopobium , Azotobacter , Bacillus, Citrobacter , Corynebacterium , Enterobacter , Enterococcus, Fusobacterium , Gluconoacetobacter , Klebsiella , Lactobacillus, Lonepinella , Methanobrevibacter , Microbacterium , Oenococcus , Pantoea , Pedi . Провиденсия , псевдомонада, селеномонада и серратия . Кроме того, некоторые виды грибов являются доминирующими продуцентами танназы , например виды Aspergilli .

МЕХАНИЗМ ТАННАЗА:
, обычно называемая танназой , катализирует гидролиз сложноэфирных и депсидных связей в таких гидролизуемых танинах, как дубильная кислота, в результате чего высвобождается глюкоза и галловая кислота.

При катализе танназой сложный эфир глюкозы галловой кислоты с дубильной кислотой последовательно гидролизуется в таннин 1,2,3,4,6-галловой кислоты, таннин 2,3,4,6-тетрапаловой кислоты и два мономера галловая кислота-глюкоза, и, наконец , образуются галловая кислота и глюкоза.

В дополнение к катализу гидролиза центральной сложноэфирной связи между двумя ароматическими кольцами дигаллата ( депсидазная активность), танназа также может обладать эстеразной активностью (гидролиз концевых сложноэфирных функциональных групп, которые присоединены только к одному из двух ароматических колец) .

Дигаллат является сопряженным основанием дигалловой кислоты, но часто используется как синоним.
Точно так же галлат и галловая кислота используются взаимозаменяемо. Б
другое дигалловая и галловая кислоты представляют собой органические кислоты, которые встречаются в галлотанинах и обычно этерифицируются до молекулы глюкозы.

Другими словами, танины (содержащие дигаллат / дигалловую кислоту) являются естественным субстратом танназы .
Когда дубильные вещества, особенно галлотаннины , расщепляются танназой посредством гидролиза сложноэфирных связей, образуются галловая кислота и глюкоза.

КАТАЛИТИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ ТАННАЗЫ:
Танназа является наиболее изученным ферментом биодеградации танина.
Танназа катализирует гидролиз сложных эфиров и депсидных связей различных субстратов, включая галланонины , эфиры галловой кислоты, эпигаллокатехин. галлат и эпикатехин галлат , высвобождая галловую кислоту и глюкозу.

Л. плантарум танназа состоит из двух доменов, одного домена α/β-гидролазы (остатки 4–204 и 396–469) и домена «крышки» (остатки 205–395).
Молекула глицерина в растворе криопротектора связывается с активным центром танназы , что имитирует связывание галлоильной части с ее субстратом.

Активный центр танназы расположен в домене α/β-гидролазы, три аминокислотных остатка Ser163, Asp419 и His451 которого представляют собой каталитическую триаду.

Л. плантарум танназа содержит 18 α-спиралей и 13 β-цепей, а Ser163 присутствует в пентапептидном мотиве Gly161-X-Ser163-X-Gly165 между β6 и α6.

В активном центре Ser163 образует водородную связь с атомом NE2 имидазольного кольца His451.
В ходе реакции His451 депротонировал гидроксильную группу Ser163, и Ser163 стабилизировался за счет водородной связи с Asp419.

ФИЗИЧЕСКИЕ И ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ТАННАЗЫ:
Физическое состояние: порошок
Цвет: нет данных
Запах: нет данных
Точка плавления/точка замерзания: Данные отсутствуют.
Начальная точка кипения и интервал кипения: данные отсутствуют.
Воспламеняемость (твердое вещество, газ): Данные отсутствуют.

Верхний/нижний пределы воспламеняемости или взрываемости: Данные отсутствуют.
Температура вспышки: данные отсутствуют
Температура самовоспламенения : данные отсутствуют
Температура разложения: Данные отсутствуют.
рН : данные отсутствуют
Вязкость
Вязкость, кинематическая: Нет данных
Вязкость, динамическая: Данные отсутствуют

Растворимость в воде: данные отсутствуют
Коэффициент распределения: н - октанол /вода: данные отсутствуют
Давление паров: данные отсутствуют
Плотность: нет данных
Относительная плотность: данные отсутствуют
Относительная плотность паров: данные отсутствуют
Характеристики частиц: данные отсутствуют

МЕРЫ ПЕРВОЙ ПОМОЩИ ТАННАЗЕ:
-Описание мер первой помощи:
*Общие рекомендации:
Лица, оказывающие первую помощь, должны защитить себя.
Покажите этот паспорт безопасности материала лечащему врачу.

*При вдыхании:
После вдоха:
Свежий воздух.
Вызовите врача.

*При попадании на кожу:
Немедленно снимите всю загрязненную одежду.
Промойте кожу водой/душем.

*При попадании в глаза
После зрительного контакта:
Смойте большим количеством воды.
Снимите контактные линзы.

* При проглатывании:
После проглатывания:
Немедленно дайте пострадавшему выпить воды (максимум два стакана).
Проконсультируйтесь с врачом.

- Указание на необходимость немедленной медицинской помощи и специального лечения:
Данные недоступны

МЕРЫ ПРИ СЛУЧАЙНОМ ВЫБРОСЕ ТАННАЗЫ:
- Индивидуальные меры предосторожности, защитное снаряжение и порядок действий в чрезвычайных ситуациях:
* Совет для неаварийного персонала:
Обеспечьте достаточную вентиляцию.

- Экологические меры предосторожности:
Не допускайте попадания продукта в канализацию.

-Методы и материалы для локализации и очистки:
Закрыть стоки.
Собирайте, связывайте и откачивайте разливы.
Берись осторожно.
Утилизируйте правильно.
Очистите пораженный участок.

ПРОТИВОПОЖАРНЫЕ МЕРЫ ТАННАЗА:
-Средства пожаротушения:
*Подходящие средства пожаротушения:
Вода
Мыло
Углекислый газ (CO2)
Сухой порошок

*Неподходящие средства пожаротушения:
Для этого вещества/смеси не даются ограничения огнетушащих веществ.

-Дальнейшая информация:
Не допускать загрязнения поверхностных вод или системы грунтовых вод водой для пожаротушения.

КОНТРОЛЬ ВОЗДЕЙСТВИЯ/СРЕДСТВА ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ TANNASE:
-Параметры управления:
--Ингредиенты с параметрами контроля рабочего места:
-Средства контроля воздействия:
--Средства индивидуальной защиты:

* Защита глаз/лица:
Используйте защитные очки.

* Защита кожи:
Полный контакт:
Материал: Нитриловый каучук
Минимальная толщина слоя: 0,11 мм
Время прорыва: 480 мин.

Всплеск контакта:
Материал: Нитриловый каучук
Минимальная толщина слоя: 0,11 мм
Время прорыва: 480 мин.

-Защита тела:
защитная одежда

-Контроль воздействия окружающей среды
Не допускайте попадания продукта в канализацию.

ОБРАЩЕНИЕ И ХРАНЕНИЕ ТАННАЗА:
- Меры предосторожности для безопасного обращения:
*Советы по безопасному обращению:
Работа под капотом.

*Гигиенические меры:
Сменить загрязненную одежду.
Вымойте руки после работы с веществом.

-Условия для безопасного хранения, включая любые несовместимости:
*Условия хранения:
Плотно закрытый.
Сухой.
Хранить под замком или в месте, доступном только для квалифицированных или уполномоченных лиц.

*Стабильность при хранении:
Рекомендуемая температура хранения: 2–8 °C

СТАБИЛЬНОСТЬ и РЕАКЦИОННАЯ СПОСОБНОСТЬ ТАННАЗА:
-Химическая стабильность:
Продукт химически стабилен в стандартных условиях окружающей среды (комнатная температура ).

-Возможность опасных реакций:
Данные недоступны

-Условия, чтобы избежать:
нет информации

СИНОНИМЫ:
Таннин ацилгидролаза